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      AMPPD發光顯色試劑盒

      發布時間:2021-7-16 訪問人數: 878

      AMPPD發光顯色試劑盒

      簡介:

      AMPPD是堿性磷酸酶的化學發光底物,在適宜的緩沖液中,隨著酶的催化水解作用,AMPPD分解成AMP-D,后者發出強度很高的光信號,其發光的速度取決于堿磷酶的濃度。當堿磷酶偶合到雜交的探針時,便可以通過此系統檢測到雜交分子的存在量。乙醇胺可使光信號輸出更理想。AMPPD為1,2-二氧環已烷衍生物,它是一種生物化學領域中最新的超靈敏的堿性磷酸酶底物,其特點:反應速度快,在很短時間內提供正確可靠的結果。在它的分子結構中有兩個重要部分,一個是聯接苯環和金剛烷的二氧四節環,它可以斷裂并發射光子;另一個是磷酸根基團,它維持著整個分子結構的穩定。在通常情況下,這種化合物很穩定。但是,結果有堿性磷酸酶存在,Dioxetane Phosphate作為酶的底物會在酶的催化一脫去磷酸根基團,形成一個不穩定的中間體。這個中間體隨即自行分解(二氧四節環斷裂),同時發射光子。 AMPPD發光顯色試劑盒適用于PVDF膜,不推薦用于硝酸纖維素膜。

      編號

      名稱

      PW0071

      25T

      PW0071

      50T

      Storage

      試劑(A):

      Dioxetane Buffer

      A1: Dioxetane A

      50ml

      100ml

      -20℃

      A2: Dioxetane B

      50ml

      100ml

      -20℃

      臨用時,取A1、A2混合,即為Dioxetane Buffer,不可預先配制。

      試劑(B): AMPPD

      2.5mg

      5mg

      -20℃ 避光

      組成:

      自備材料:

      1、轉印了蛋白并已以抗體-酶復合物檢測過的PVDF膜

      2、Tris鹽緩沖液(TBS)

      3、透明的塑料保鮮膜

      4、蒸餾水

      操作步驟(僅供參考)

      臨用前,取適量的A1和A2,混合后獲得Dioxetane Buffer。

      AMPPD溶于Dioxetane Buffer, 配制AMPPD底物溶液即為AMPPD Dioxetane Buffer(發色發光顯跡液),用于膜的染色。

      取適量Dioxetane Buffer洗膜。

      對于PVDF膜進行的堿性磷酸酶反應, 膜置于新鮮配制的AMPPD Dioxetane Buffer 作用。

      將膜移入適量的AMPPD Dioxetane Buffer中,浸泡(AP反應)。

      取出PVDF膜,滴干水分,將膜正面朝下放在一張透明的塑料保鮮膜上,向后折疊將膜包裹起來,成為不漏水的封閉體。

      在暗房中,將膜正面朝下放在感光膠片上,曝光數秒至數小時。

      如需要,在室溫下以適量的TBS洗膜。

      將膜放入AMPPD Dioxetane Buffer。

      10、用蒸餾水洗膜,終止反應。晾干后拍照留永久的記錄。

      注意事項:

      PVDF膜置于膠片上后,不要改變位置。

      曝光時間應根據實驗情況,自行摸索。

      配制好的AMPPD Dioxetane Buffer,應避光低溫保存。

      為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

      有效期: 12個月有效。

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