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HEPES緩沖液配制方法
HEPES溶液:一種弱酸,中文名字是4-羥乙基哌嗪乙磺酸。用作生物緩沖試劑,可配制蛋白提取緩沖液、細胞培養用緩沖液等。pH范圍6.8-8.2。
關于 HEPES 緩沖溶液的配制, 不同的文獻資料有不同的說法。 根據用途, 一種是單純的 HEPES+NaOH, 另一種是 HEPES+鹽。各種配制方法總結如下:
一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution 的配制
119.15 g HEPES 溶解在 400ml 蒸餾水中,加 0.5~1M的NaOH水溶液調節至少所需pH(HEPES 的有效 pH 范圍是 6.8~8.2),然后用蒸餾水定容至 500ml,于 4 攝氏度保存。
二、加少量鹽的 HEPES Buffer 配方(500ml)
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4·7H2O 0.198g,用 0.5M NaOH 水溶液調節pH值,最后定容。
三、2×HEPES 緩沖鹽溶液的配制
將 1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4·2H2O、0.2g 葡聚糖(glucan or dextran)和 1g HEPES 溶 解在 90ml 的蒸餾水,用 0.5M NaOH 調節至所需 pH 值,再用蒸餾水定容至 100ml 即可。