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HEPES特性、應用及注意事項
HEPES的緩沖特性
Hepes是一種兩性離子磺酸緩沖液,它是Norman E. Good 在1966年描述的首批好的緩沖劑之一。
HEPES具有以下特征:
· pKa1 (25 °C) = 3
· pKa2 (25 °C) = 7.5
· 有效緩沖范圍= 2.5至3.5或6.8至8.2
大多數細胞的最佳培養環境為pH 7.2-pH 7.4,HEPES的緩沖范圍正好落在pH 6.8-pH 8.2,有利于細胞培養。
HEPES的應用
· 細胞和組織培養
· 蛋白質純化與提取
· 免疫沉淀
· 細胞裂解
· HEPES具有可忽略的金屬離子結合,所以成為可能被金屬螯合抑制的酶的緩沖劑的良好選擇
注意事項
· 不適用于氧化還原研究
· 它影響神經元細胞的膜電位
· 干擾過氧化物酶對酚的氧化作用
· 它非常易溶于水
· 它與金屬離子的結合微乎其微
· 盡量將含有HEPES的溶液置于黑暗中,以防止氧化